光片荧光显微镜（Light Sheet Fluorescence Microscopy, LSFM）的概念产生于1903年，但此后很长〓时间并无太多发展。上世纪九十年代，华盛顿大学的Francis Spelman实验室为了对小鼠毛细胞□的结构和耳蜗的其他特性进行定量测量，发展了一系列实验方法。实验室研究人员受到前人使用侧向光片照明观察表面结构的启发，发明了正交↓平面荧光光学切片装置（orthogonal plane fluorescence optical sectioning, OPFOS），并第一次获得了整个耳蜗的清晰荧光图像(1) (2) (3)。2004年，SPIM（Single plane illumination microscopy ）文章的发表大大促进了光片显微镜的发展和使用(4)，文章强调了其用于胚胎⌒ 发育研究的实用性，并给出了青鳉神经节细胞搏动以及果蝇胚胎发育长时■间成像的荧光图像。 2010年，在第一届光片荧光显▽微镜研讨会上，研究〗者们决定将LSFM作为这一类显微镜的统一名称(5)。后续又出现了很多形式的光片显微镜，如扫描光片(6)、双光子扫描光片(7)和bessel beam(8)、lattice(9)等新式光片显微镜。这些方法不断改善光片显微镜√的成像分辨率、穿透深度和成】像视野，以期满足生物学发展的需要。
光片显微系统成像原理
光片显微系统使用一层光束从样品侧面♀激发荧光样品，使用CCD或SCMOS进行检测，照明光路和荧光检测光路互相垂直。由于样品受激发的平面就是成像平面，不存在离焦激发，可以自动获得光学切片，从而将光漂白和光学损伤降到最低。光片显微系统使用CCD或SCMOS成像，速度通常为每秒几十帧，甚至上百帧，所以通过在光☆片下移动样品使入射光束激发不同的平面，可以很容易又非常快速的得到整个组织的3D图传统共聚焦的激发和检测是同一个方向，整个照射区域都处于被激发状态，没有被检测的区域经过长时间的照射易被淬灭，无法保证几天的记录；另外共聚焦使用点扫描成像，速度相对较慢。
2015年，Leica推出了自己的光片系统，该系统使用独特的 TwinFlect 反光镜装置使激发光束从左右两个方向入射到样品上，照明均匀，保证了细胞水平的分辨『率。成像速度快、分辨率高和光毒性低的特点可使样品在该系统中保持其生物活性，完成数小时乃至数天的长时间活体生物培养∏及成像。另外，Leica光片系统以共聚焦为基础，可以实现与共聚焦显微镜的联合使用，完成光激活、光转换等操作及后续追踪的实验。
Leica光片显微系统常见应用
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胚胎与小型生物(如模式动物斑∏马鱼、线虫、果蝇等，植物拟南芥等)发育过程中的快速三维成像，例如：细胞迁移、心脏及血管发育、神经发育等▓。
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三维细胞培养、球体和囊※肿、组织培养、器官培养的实▃时成像。
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结合共聚焦或双光子激光显微镜，完成光学刺激与追踪的功能，观察和实验方式更为灵活多样。
1.快速3D成像
2.活体ξ 快速长时间3D成像，捕捉整个动态过程
3.唯一可以结合共聚焦和光片的系统，实现光学操作的后续追踪
长时间的图像采集需要维持样品的活性，Leica光片系统可加载孵育装置，为样品提供良好的生长条件，保持活性。另外整个系统的开放性很高，有更多可操作的空间。
